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大蒜油的抗菌作用的初步研究
全日爱商城   2020-07-10

 

  大蒜的挥发性物质、大蒜汁及蒜素在试管内对多种致病菌如大肠杆菌、葡萄球菌、肺炎双球菌、链球菌及白喉、痢疾、伤寒、外伤寒、结核杆菌和霍乱弧菌等都有明显的抑制或杀灭作用。临床已试用于治疗隐球菌脑膜炎、肺部及消化道霉菌感染,白色念珠菌引起的小儿消化不良、头癣等。大蒜油是从大蒜中提取的一类与水不相溶的具有挥发性的有机硫化物。本文通过水蒸汽蒸馏得到大蒜油样品,研究了大蒜油对污染食品的多种微生物的抗菌作用,实验证明大蒜油具有较宽的抗菌谱。

  1•1 大蒜油

  材料与方法

  1•2 菌种

  实验室通过水蒸汽蒸馏制备。

  1•3 培养基

  金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus);伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphi);变性杆菌(Proteusvulgaris);大肠杆菌(Escherichiacoli);肉毒梭菌(Clostridiumbotulinum);黄曲霉(As-pergillusflavus);黑曲霉(Aspergillusniger);产朊假丝酵母(Candidautilis);啤酒酵母(Sac-charomycescerevisiae).

  1•4 抑菌液的制备

  细菌:LB培养基 酵母:麦芽汁培养基霉菌:察氏培养基

  1•5 供测试菌悬液的制备

  通过水蒸汽蒸馏得到大蒜油样品,仿大蒜油针剂制法,用微量取样器取大蒜油0•15ml,溶于1•5ml灭菌的吐温-80中,混合均匀,用无菌水逐次少量加入至全部溶解后,定容至15•0ml,得到10-2浓度的大蒜油溶液,依次用无菌水稀释得到5×10-2,10-3,5×10-3,10-4,5×10-4,10-5等不同浓度的大蒜油溶液,另用10-2浓度的吐温-80作空白实验。

  1•6 最低抑菌浓度(MIC)的测定

  将菌种进行斜面活化后,分别用接种环挑取二环菌体,用无菌生理盐水稀释,振荡几分种,调整菌浓度为105~106cfu/ml。

  1•7 最低杀菌浓度(MBC)的测定

  把以上制备的各种菌悬液各取0•1mL,分别加入到各种浓度的5mL大蒜油溶液中,充分摇匀。霉菌28℃,培养48h;酵母30℃,培养24h;细菌37℃,培养24h。取出观察结果。如果管底有膜状生成物或试管内液体浑浊为阳性管。管内液体澄清,肉眼未见有菌生长者为阴性管。找出最低大蒜油溶液浓度的阴性管,则为其最低抑菌浓度。

  1•8 大蒜油的浓度与抑菌率的关系

  把上述各种混合管继续培养,各种细菌、酵母菌再培养24h,霉菌再培养48h,取出观察结果。原为澄清无菌生长的阴性管可能出现长菌现象,找出澄清无菌生长的最低浓度管即为其最低杀菌浓度(MBC)。最低抑菌浓度与最低杀菌浓度可能相同,也可能不同。

  2 结果与讨论

  2•1 大蒜油对供试菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度

  用无菌水与大蒜油分别制成若干浓度的大蒜油稀释液,向不同浓度的大蒜油溶液中。用无菌水与大蒜油分别制成若干浓度的大蒜油稀释液,向不同浓度的大蒜油溶液中加入各种菌悬液0•1mL,充分摇匀,然后分别从中各取1•0mL混合液,用与微生物对应的培养基倾注双碟平皿。另外再用每种菌悬浮液0•1mL和1•0mL无菌水混合倾注双碟平皿以作空白对照。把以上各双碟平皿进行培养,霉菌28℃,培养48h;酵母30℃,培养24h;细菌37℃,培养24h。取出分别数菌落数。并与对照皿按公式计算出各种浓度的大蒜油对供试菌的抑菌率。

 

  2•2 讨论

  大蒜油抗菌作用机制可能是大蒜油的有机硫化物使巯基失活,而抑制了与微生物生长繁殖有关的含巯基酶的缘故。以上的研究结果表明,大蒜油对很多污染食品的微生物具有很强的抑制与杀灭作用,它具有较宽的抗菌谱。在食品防腐方面具有广阔的应用前景。

 

  大蒜油的浓度对抑菌率的影响如表2所示。实验结果表明,大蒜油的浓度越高,抑菌率越大。浓度为10-3时,抑菌率一般在50%~70%,浓度为10-2时,抑菌率大多在90%以上。

  大蒜油对供试菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)如表1所示。从抑菌和杀菌实验证明,大蒜油对很多污染食品的微生物都有抑菌和杀菌作用。最低抑菌浓度(MIC)大都在10-3~10-4,最低杀菌浓度(MBC)也大都10-3~10-4。

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